利用多角度動態(tài)光散射原理檢測儀用于檢測蛋白質(zhì)聚集

      近年來多種基于蛋白的新型藥物制劑已經(jīng)商業(yè)化。

      作為復(fù)雜的高分子，蛋白質(zhì)存在分子間和分子內(nèi)的互相作用。這種相互作用會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性和集聚，并改變蛋白質(zhì)的粒徑分布從而影響蛋白質(zhì)制劑的有效性。其較大粒徑分布范圍在0.1微米至1微米之間。

    動態(tài)光散射原理是一種粒徑分析技術(shù)，非常適合于0.1微米-1微米這個粒徑范圍的粒子的檢測，隨著蛋白質(zhì)的聚集作用，可能會導(dǎo)致蛋白質(zhì)的濃度偏低。

    動態(tài)光散射技術(shù)可運(yùn)用正散射角度來增加捕捉大粒子的靈敏度。Nicomp380儀器不僅擁有正散射，還擁有多角度散射，不僅能夠?qū)悠愤M(jìn)行90度光角度的檢測，還可以同時進(jìn)行正散射和背散射。上圖A是對牛血清蛋白樣品進(jìn)行90度散射的粒徑分布圖。如圖所示，有兩個粒徑分布峰，其中平均粒徑在6納米的峰顯示的是該蛋白質(zhì)的主要粒徑分布。而另一個粒徑較大的峰顯示的是該蛋白質(zhì)中所含的有集聚現(xiàn)象的大粒子的粒徑分布。前者才是該蛋白質(zhì)的真實(shí)粒徑分布。上圖B是對牛血清蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行20度散射的粒徑分布圖。如圖所示，大粒子的峰占據(jù)了主峰位置，很顯然，多角度的動態(tài)光散射粒度儀能夠更好地對蛋白質(zhì)的真實(shí)平均粒徑進(jìn)行檢測。